PCR-menetelmä (polymeraasiketjureaktio) on modernin DNA-diagnoosin "kultainen standardi", erittäin herkkä molekyylibiologinen menetelmä. PCR-menetelmää käytetään lääketieteessä, genetiikassa, kriminologiassa ja muilla aloilla. Sitä käytetään usein ja menestyksekkäästi monien tartuntatautien diagnoosiin.
Tartuntatautien diagnoosi PCR: llä
PCR-testi mahdollistaa paitsi patogeenin, myös jopa yhden yksittäisen fragmentin, havaitsemisen tutkittavan aineen sisällä. Tutkittu (biologinen) materiaali on laskimoverta, epiteelisolut ja sukuelinten, siittiöiden, syljen, ysköksen ja muiden biologisten eritteiden salaisuus. Vaadittu biologinen materiaali määräytyy väitetyn taudin varalta.
Tietenkin nykyään PCR-menetelmä on voimakas diagnostiikkatyökalu. Ehkä ainoa tutkimuksen haitta on sen korkea hinta.
Sellaisten tautien luettelossa, joiden läsnäolo voidaan määrittää PCR-menetelmällä:
- virus- ja bakteeripneumonia;
- tuberkuloosi;
- tuhkarokko, vihurirokko, parotiitti;
- tarttuva hepatiitti kaikissa muodoissaan;
- salmonelloosi, kurkkumätä;
- Helicobacteriosis ja suolistosairauksien aiheuttamat sairaudet;
- STD: t (sukupuolitaudit): gonorrea, klamydia, ureaplasmoosi, kuppa, aids, sukupuolielinten herpes, gardnerellez ja muut.
STI-seulonta käyttäen PCR-menetelmää
Toisin kuin perinteiset analyysit, PCR-tekniikka mahdollistaa sukupuoliteitse tarttuvien infektioiden (STI) havaitsemisen, vaikka niiden oireet olisivat täysin poissa. Biologisen materiaalin keräämistä varten naiset ovat puhdistettuja kohdunkaulan epiteelisoluja, virtsaputken naarmuuntumista. Tarvittaessa PCR-menetelmä tekee tutkimusta laskimoverestä.
Täten PCR-menetelmää käyttävä STI-testi mahdollistaa tunnistamisen:
- ihmisen immuunikatovirus (HIV);
- vaalea treponemus (syfilisin aiheuttaja);
- Herpes simplex -virus ja sytomegalovirus;
- ihmisen papilloomavirus (HPV);
- klamydia, toksoplasma, mykoplasmat, ureaplasma ja muut seksuaaliset infektiot.
Jos PCR-analyysi suoritetaan oikein, väärien positiivisten tulosten todennäköisyys on suljettu pois. Erikseen mainittakoon ihmisen papilloomavirus (HPV) ja PCR-menetelmän merkitys sen diagnoosille. Toisin kuin onkosytyttinen tahra, PCR-menetelmä voi määrittää spesifisen HPV-tyypin, erityisesti sen onkogeeniset tyypit 16 ja 18, joiden läsnäolo uhkaa naista, jolla on niin vakava ja usein kohtalokas sairaus kuin kohdunkaulan syöpä . Oncogeenisten HPV-tyyppien PCR-menetelmän oikea-aikainen havaitseminen tarjoaa usein mahdollisuuden estää kohdunkaulasyövän kehittyminen.
Immunoentsyymianalyysi (ELISA) ja polymeraasiketjureaktio (PCR): pluses and minuses
Mikä diagnoosimenetelmä on parempi: PCR tai ELISA? Oikea vastaus tähän kysymykseen ei ole olemassa, koska pohjimmiltaan diagnoosi näiden kahden tutkimuksen avulla on eri tarkoitusta. Ja useammin menetelmiä IFA ja PTSR sovelletaan kompleksissa.
PCR-testi on välttämätöntä infektion spesifisen haitallisen aineen määrittämiseksi, ja se voidaan havaita välittömästi infektion jälkeen, vaikka taudin oireiden ilmaantumista ei ole. Tämä menetelmä on ihanteellinen piilotettujen ja kroonisten bakteerien ja virusinfektioiden havaitsemiseen.
Toisin kuin PCR-tekniikalla, ELISA-menetelmä on suunniteltu havaitsemaan infektion aiheuttavan aineen, mutta sen organismin immuunivastetta, toisin sanoen vasta-aineiden läsnäolon ja määrän osoittamiseksi tietylle patogeenille. Riippuen havaittujen vasta-aineiden tyypistä (IgM, IgA, IgG) voidaan määrittää infektoivan prosessin kehitysaste.
Molemmilla menetelmillä ja PCR: llä ja ELISA: lla on korkea luotettavuus (100 ja 90% vastaavasti). Mutta on tärkeää huomata, että ELISA-analyysi joissakin tapauksissa antaa vääriä positiivisia (jos henkilö on sairastanut tiettyä tautia aiemmin) tai vääriä negatiivisia (jos infektio suoritettiin suhteellisen hiljattain).